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| 别名: | LNCaP；人前列腺癌细胞 | ||
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| 储存条件: | -20℃ | ||
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| 货号 | 规格 | 可用库存 | 销售价(RMB) | 您的折扣价(RMB) | 购买数量 | ||||||
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| ZY-C6184H-ZY-C6184H | 1×10^6cells/T25培养瓶 | 现货 | 1700.00 | ||||||||
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| 储存条件: | -20℃ |
Lncap（人前列腺癌细胞）
| 一、细胞基本属性 | ||||
| 细胞名称 | LNCaP人前列腺癌细胞 (STR鉴定正确) | |||
| 细胞别称 | LNCaP；人前列腺癌细胞 | |||
| 种属来源 | 人 | |||
| 年龄性别 | 男；50岁 | |||
| 组织来源 | 前列腺；左锁骨淋巴结癌转移灶 | |||
| 生长特性 | 贴壁生长 | |||
| 细胞形态 | 上皮细胞样 | |||
| 细胞代数 | 10代以内 | |||
| 背景介绍 | LNCaP细胞由HoroszewiczJS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。5-α-双氢睾酮可影响该细胞的生长和酸性磷酸酶的产生。该细胞不形成均一的单层而是成簇生长，所以传代的时候要反复吹打形成单个细胞；该细胞贴壁不牢，达不到汇合状态，而且会使培养基迅速变酸；传代后48h内一定要保持培养瓶静止，如果此时挪动培养瓶，会使大部分细胞从瓶底脱落。如果出现此种情况，需要重新孵育24~48h使细胞重新贴壁，细胞贴壁后可更换培养基。 | |||
| 特别注意 |
1. LNCaP细胞长得较慢，复苏和传代后需24-48小时贴壁。该细胞贴壁不牢，仅仅轻轻地吸附在皿底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。生长很慢，传代后48小时内不应移动。 2.细胞封包、寄出时，罐装运输后通常多数细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24到48小时，以使细胞再贴壁，此后换上新鲜培养液。如仍有细胞漂浮，需将培养瓶内容物收集，800rpm离心5分钟，用新鲜培养液重悬并培养到一个6cm培养皿或T25培养瓶中。 |
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| STR位点信息 | Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，11；D13S317：10，12；D16S539：11；D18S51：9，11，12；D19S433：13.2，15；D21S11：29，32.2；D2S1338：16，17；D3S1358：16；D5S818：11，12；D7S820：8.1，9.1，10.3；D8S1179：12，14；FGA：19，20；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：16，18； | |||
| 使用权限 | A类 | |||
| 细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 | |||
| 支原体检测 | 无 | |||
| 保藏机构 | 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心 | |||
| 培养基 | RPMI-1640+ FBS 10%+Glutamax 1%+Sodium pyruvate 1 %+p/s 1% | |||
| 培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ | |||
| 冻存条件 | 无血清冻存液，液氮储存 | |||
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
c、弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
d、待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
c、用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
d、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
