牦牛源性成分PCR检测试剂盒

牦牛源性成分PCR检测试剂盒

英文名称：Yak-Derived Material PCR Kit

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

 其他：

产品介绍：

产品及特点

本试剂盒可用于检测食品或其他材料中是否有牦牛的成分。现代食品加工工艺极大改变了食材原有的味道、气味、色泽、纹理和质地等特性，因此传统的感官鉴别技术已经无法对食材的真伪进行准确的鉴定。同时部分食材还有致敏性，因此基于基因检测的快速灵敏的食材来源检测技术将对食品监管和安全提供重要的保障。本产品就是为满足这一需求根据PCR原理开发的产品，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品DNA。

2. 根据牦牛保守区域设计引物，能专一性地检测出样品中的牦牛成分，但不能检测其他非牦牛成分。

3. 比ELISA更加灵敏。对混合样品中牦牛成分的检测下限为0.1%，对样品中牦牛成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。

4. 快速，整个检测过程（按一个样品计）需2.0小时左右。

5. 提供阳性标准品，便于分析实验结果。

6. 本只能用于科研，足够50次20μL体系的常规PCR。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。HIV-2前病毒PCR阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 样品DNA。

使用方法 一、样品DNA的制备

1. 用自选方法纯化N+2个样品的RNA，本试剂盒跟市场上大多数动植物DNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20次核酸释放剂试用装

2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在跟试剂盒所要求的样品体积相当的水中（如果试剂盒一次处理需要200uL样品，则此处使用200uL水），加10μL牦牛源性成分PCR阳性对照的10000倍稀释液（需要提前将阳性对照稀释10000倍）而得，样品制备阴性对照是直接用所需量的水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。

二、设置PCR反应（40μL体系）

3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：

成分 N+2个

样品管 PCR

阴性对照 PCR

阳性对照

PCR MagicMix 3.0 各20 μL 20 μL 20 μL

牦牛源性成分PCR引物混合液 各2 μL 2 μL 2 μL

N+2个样品DNA模板 各18 μL - -

PCR阴性对照（水） - 18 μL -

PCR阳性对照（牦牛源性成分PCR阳性对照的10000倍稀释液） - - 18 μL

4. 按下表设置PCR反应：

过程 温度 时间

预变性 95℃ 5 min

PCR反应

（35个循环） 95℃ 45 sec

54℃ 45 sec

72℃ 30 sec

最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为319bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。