新加坡石斑鱼虹彩病毒PCR试剂盒

新加坡石斑鱼虹彩病毒PCR试剂盒

英文名称：Singapore Grouper Iridovirus(SGIV)

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

 其他：

产品介绍：

产品及特点

新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore Grouper Iridovirus，SGIV)是一种DNA 病毒，感染后主要是会造成造血织组坏死，传染方式主要是以水平感染为主，该病的外观临床症状一般包括：体表无明显损伤，嗜睡，游泳异常；贫血症状明显，血液稀薄、色淡，凝固性差，鳃外观呈暗灰色；肾脏失血，呈灰白色等。但病鱼的临床症状也存在一定的差异，该病毒的感染对养鱼业造成严重损害，因此新加坡石斑鱼虹彩病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。本产品就是基于 PCR 技术的快速诊断产品，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增新加坡石斑鱼虹彩病毒，与其他病

毒没有交叉反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。新加坡石斑鱼虹彩病毒 PCR 阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次核酸释放剂试用装，

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和

一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照用 SV40 病毒 PCR 阳性对照的10000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分N+2 个样品管PCR阴性对照PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL

SV40 病毒 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL

N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -

PCR 阴性对照（水） - 18 μL -

PCR 阳性对照（SV40 病毒 PCR 阳 性 对 照 的10000 倍稀释液）- - 18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程 温度 时间

预变性 95℃ 5 min

PCR 反应（35 个循环）95℃ 15 sec60℃ 60 sec

最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR产物长度为 180bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩

增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。