猴病毒40 PCR试剂盒

猴病毒40 PCR试剂盒

英文名称：Simian Virus 40(SV40)

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

 其他：

产品介绍：

产品及特点

SV40 是猴病毒 40（Simian Virus 40）的缩写，其基因组是一种环形双链的 DNA，基因组 5.2kb。SV40 在体外可使人及动物多种组织类型的正常细胞发生恶性转化，在转基因小鼠体内可诱发多种肿瘤形成，并且人类许多肿瘤的发生也与之有关。SV40 和 BK 病毒（BKV，BK Virus）、JK 病毒（JKV，JK Virus）等病毒的生物学特性各不相同，但由于新生的小鼠、大鼠、仓鼠、家兔、豚鼠等对这些病毒都特别敏感，多个部位或器官会发生肉瘤或癌症，故又通称多瘤病毒(Polyoma Virus)。本产品就是专门用于检测 SV40 的高灵敏荧光定量 PCR 检测方法，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增 SV40 病毒，与其他病毒没有交叉反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。SV40 病毒 PCR 阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次核酸释放剂试用装，

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和

一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照用 SV40 病毒 PCR 阳性对照的10000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分N+2 个样品管PCR阴性对照PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL

SV40 病毒 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL

N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -

PCR 阴性对照（水） - 18 μL -

PCR 阳性对照（SV40 病毒 PCR 阳 性 对 照 的10000 倍稀释液）- - 18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程 温度 时间

预变性 95℃ 5 min

PCR 反应（35 个循环）95℃ 15 sec60℃ 60 sec

最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR产物长度为 180bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩

增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。