血吸虫通用LAMP试剂盒

血吸虫通用LAMP试剂盒

英文名称：Schistosoma spp.

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

其他： 

产品介绍

产品及特点

血吸虫是人畜互通寄生虫。其储存宿主种类较多，主要有牛、猪、犬、羊、 马、猫及鼠类等 30 多种动物。病人及患病耕牛为主要传染源，其次，为受感 染的羊、猪、犬、马、鼠类等。血吸虫尾蚴穿透皮肤可引起皮炎。大量童虫在 人体内移动时，可引起咳嗽、咳血、发热等症状。成虫寄生于寄主的肛门静脉 和肠系膜经脉中，虫卵沉积于肝脏和肠壁等组织，形成虫卵肉芽肿，最后导致 肝硬化，引起贫血、消瘦、浮肿和腹水。儿童和幼畜因不能正常发育可成为侏 儒，成人丧失劳动力，妇女不孕不育，甚至致死，因此快速检测血吸虫具有重 要的意义，为此本公司开发了简单快捷的血吸虫通用 LAMP 检测试剂盒，它具 有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 样品。

2. 用 LAMP 恒温扩增法扩增血吸虫特异 DNA 片段，能扩增多种血吸虫。

3. 不需要荧光 PCR 等贵重仪器。同时扩增时间最快时需要 1 小时，尤其适 合现场或实验条件简陋的单位使用。

4. 检测灵敏性比 PCR 高 10 倍以上。

5. 特异性高，由于使用四条针对血吸虫通用保守基因的特异引物，比使用 2 条引物的 PCR 专一性更高。

6. 提供无传染性的阳性对照，便于分析实验结果。

7. 本试剂盒足够做 50 次 20μL 体系的 LAMP 扩增。本产品只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。血吸虫通用 LAMP 阳性对照最好单 独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 待测样品。

使用方法 一、样品 DNA 的制备 1. 用自选方法纯化样品 DNA，本试剂盒跟市场上大多数 DNA 提取试剂盒兼 容。本试剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的核酸释放剂试用装

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个样品制备，包括一个样品制备阳性对 照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。样品使用量根据所选择的试剂 盒决定。如果样品使用量为 XmL，则在 XmL 水中加 10μL 血吸虫通用 LAMP 阳性对照的 10 倍稀释液作为样品制备阳性对照，样品制备阴性对 照是直接用 X mL 水作为阴性对照，然后和 N 个样品一起进行病毒 DNA 提取操作，得到 N+2 个 DNA 样品。

二、LAMP（20μL 体系）

3. 反应设置：如果有 N+2 个 DNA 纯化样品，则最好设置 N+4 个 LAMP 扩 增，增加 LAMP 阴性对照和阴性对照各 1 个。在 N+4 个 PCR 管中加入下 列成分：

成分 N+2 个 样品管 LAMP 阴性对照 LAMP 阳性对照

2×LAMP MagicMix 各 10 μL 10 μL 10 μL

5×血吸虫通用 LAMP 引物混合液 各 4 μL 4 μL 4 μL

N+2 个样品 DNA 各 6 μL - -

自备超纯水 6 μL -

血吸虫通用阳性对照 的 10 倍稀释液 - - 6 μL

4. 置于 63℃保温 60-120 分钟。如果是在 PCR 仪中保温，必须加热盖。如 果用金属浴保温，没有热盖，建议覆盖 30μL 石蜡油，否则保温期间反应 体系的水分会蒸发，影响反应效率。

5. 电泳确认实验结果：取 10μL LAMP 扩增产物直接进行 2-3%琼脂糖凝胶 电泳。LAMP 阳性对照必须有正常 LAMP 条带（200bp 的梯形扩增产物）， LAMP 阴性结果必须无条带，否则实验结果无效，需要跟厂家联系。如果 LAMP 阳性对照和阴性对照结果正常，再分析待测样品。

6. 典型的电泳结果见下表（奇数样为阴性结果，偶数样为阳性结果。此处的 9 号和 10 号跟上步照片中的 9 号和 10 号是相同的两个样品）：