幽门螺旋杆菌(PCR试剂盒

幽门螺旋杆菌(PCR试剂盒

英文名称：Helicobacter pylori

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

其他：

产品介绍：

产品及特点 幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)是一种螺旋形、微厌氧、对生长条件要求十分苛刻的细菌，也是目前所知能够在人胃中生存的唯一微生物种类，该细菌会引起幽门螺杆菌病，包括由幽门螺杆菌感染引起的胃炎、消化道溃疡、淋巴增生性胃淋巴瘤等。慢性胃炎和消化道溃疡患者的普遍症状为：食后上腹部饱胀、不适或疼痛，常伴有其他不良症状，如嗳气、腹胀、反酸和食欲减退等。有些患者还可出现反复发作性剧烈腹痛、上消化道少量出血等。据此，专家们认为，及早发现幽门螺杆菌感染者，及时而有效地用抗菌素杀灭幽门螺杆菌，对预防和控制胃癌有重大意义，因此快速检测幽门螺旋杆菌具有重要意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供细菌DNA模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增幽门螺旋杆菌。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。

6. 本产品只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 样品DNA。

使用方法 一、样品DNA的制备

1. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。

2. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的DNA释放剂，本产品的裂解液可以直接作为PCR模板，省略了DNA提取步骤。

二、设置PCR反应（40 μL体系）

3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：

成分 N+2个

样品管 PCR阴性对照 PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0 各20 μL 20 μL 20 μL

幽门螺旋杆菌 PCR引物混合液 各2 μL 2 μL 2 μL

N+2个样品DNA模板 各18 μL - -

样品制备阴性对照 - 18 μL -

样品制备阳性对照 - - 18 μL

4. 按下表设置PCR反应：

过程 温度 时间

预变性 94℃ 5 min

PCR反应

（35个循环） 94℃ 20 sec

50℃ 20 sec

72℃ 30 sec

最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。