羊痘病毒LAMP试剂盒

羊痘病毒LAMP试剂盒

英文名称：Capripox Virus

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

其他： 

产品介绍

产品及特点

羊痘病毒(Capripox Virus) 是一种存在于羊上皮细胞屑中的病毒，能够引 发以体表无毛处皮肤痘疹，能够使上呼吸道、口腔和食管部黏膜形成纤维素性 坏死假膜。该病毒对外界是环境的抵抗力相当强，对羊的健康有巨大的潜在危 害，因此羊痘病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，为此本 公司开发了简单快捷的羊痘病毒 PCR 检测试剂盒。本产品具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增羊痘病毒，与其他病毒没有交叉反 应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次核酸释放剂试用装，

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和 一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在 200μL 水中加 10μL 羊 痘病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接 用 200μL 水。提取结束后最后得到 200μL 模板 DNA（每个样品）放冰上 待用，溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL，否则 PCR 抑制物很可能会 抑制 PCR。

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照 PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL 羊痘病毒 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - - PCR 阴性对照（水） - 18 μL - PCR 阳性对照（羊痘病毒 PCR 阳性 对照的 10000 倍稀释液） - - 18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程 温度 时间 预变性 95℃ 3 min PCR 反应 （35 个循环） 95℃ 20 sec 57℃ 15 sec 72℃ 30 sec 最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 445bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。