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| 别名: | 禽疱疹病毒通用PCR试剂盒 | ||
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禽疱疹病毒通用PCR试剂盒
英文名称：Avian Herpesvirus(Gallid Herpesvirus、GaHV)
运输：低温
保存：负20度
有效期：一年
货期：2-3周
其他：
产品介绍：
产品及特点
禽疱疹病毒(Avian Herpesvirus，Gallid Herpesvirus，GaHV) 会引起众 多禽类感染病，如鸡马立克氏病，其特征为外周神经淋巴样细胞浸润和增大， 引起肢（翅）麻痹，以及性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤肿瘤病灶。本病 是一种世界性疾病，目前是危害养鸡业健康发展的三大主要疫病（马立克氏病、 鸡新城疫及鸡传染性法氏囊病）之一，引起鸡群较高的发病率和死亡率，对养 殖业造成严重损害，因此禽疱疹病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着 重要作用，为此本公司开发了简单快捷的禽疱疹病毒通用 PCR 检测试剂盒， 它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增禽疱疹病毒，但跟其他微生物无交 叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。
6. 本产品只能用于科研。
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 的阳性对照再加 上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为 PC。另外用 水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试 剂盒兼容。也可以选购本公司的病毒 DNAout 或柱式病毒 DNAout。本试 剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的核酸释放剂，本产品的裂解液可 以直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。
二、设置 PCR 反应（40 μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照管 PCR 阳性 对照管 PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL 禽疱疹病毒 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - - PCR 阴性对照（超纯水） - 18 μL - PCR 阳性对照（禽疱疹病毒通用 PCR 阳性对照） - - 18 μL
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 温度 时间 预变性 95℃ 5 min PCR 反应 （35 个循环） 95℃ 30 sec 50℃ 30 sec 72℃ 30 sec 最后延伸 72℃ 5 min
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。
电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 250 bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
