乙酰胆碱酯酶染色液（亚铁氰化铜法）试剂盒

乙酰胆碱酯酶染色液（亚铁氰化铜法）试剂盒

英文名称：Acetyl cholinesterase Staining Solution Kit 

运输：常温

保存：常温

有效期：1年

货期：3-5天

其他：

产品介绍：

产品及特点

胆碱酯酶（cholinesterase，ChE）属于特异性酯酶，可分为两大类。一 类是乙酰胆碱酯酶（Acetyl cholinesterase，AChE）又称为真性胆碱酯酶， 能水解乙酰胆碱，起到生理的调节作用；另一类为胆碱酯酶，又称假性胆碱酯 酶（Pseudo cholinesterase，PsChE），能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆 碱酯。AChE 主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板 处；PsChE 主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内。

本产品的染色原理是乙酰胆碱酯酶水解碘化乙酰硫代胆碱，释放乙酸和硫 代胆碱。硫代胆碱中的硫氢基(-SH)把铁化钾还原为亚铁化钾，后者与铜离子 结合形成不溶性的红棕色至深棕色的亚铁氰化铜沉淀在酶活性部位而显示出 来。本产品特点如下：

1. 操作简单、酯酶的扩散较少。

2. 可用于观察中枢神经和周围神经纤维等疾病情况下的改变。

3. 有机农药中毒时可使该酶受到抑制，酶的活性下降而呈阴性反应。

运输及保存 低温运输，4℃避光保存（其中溶液 A2 需常温保存，溶液 A6 需-20℃避光保 存），有效期半年。

自备试剂 10%甲醛钙固定液（CAT#:131276）

使用方法

1. 冰冻切片，厚 6 μm，不固定或置于遇冷的 10%甲醛钙固定液中固定 10 分钟。

2. 蒸馏水洗 3 次，每次 1 分钟。

3. 配制溶液 A 混合液：临用前，取 A2 加入 A1 中，使后者完全溶解，得到 A12混合液。取适量的溶液 A12混合液、溶液 A3、A4、A5、A6，按 1： 7：1：1：0.2 比例充分混匀，即可得到溶液 A 混合液，6 小时内使用。 注：如果想显示 AChE 和 ChE，即无需区分 AChE 和 ChE，无需加入 溶液 A6。

4. 切片加入到预温的配制好的溶液 A 混合液中，37℃避光孵育 1~3 小时（一 般不超过 6 小时），至切片呈淡棕色时取出。

5. 蒸馏水冲洗，镜下观察如活性部位仍较淡，可于蒸馏水洗后再进行孵育， 至反应合适为止。

6. 流水冲洗 5 分钟。

7. 滴加溶液 B 浅染细胞核 3~5 分钟。

8. 流水冲洗 10 分钟。

9. 常规脱蜡透明，中性树胶封固。

10. 染色结果：AChE 酶活性部位为红棕至深棕色，细胞核为蓝色。

阴性对照（可选步骤） 

取配置好的溶液 A 混合液，按溶液 A 混合液：溶液 C=50：1 比例充分混 匀得到溶液 AC 混合液。取相同切片加入溶液 AC 混合液中，其余操作同上， 染色结果呈阴性反应。