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| 别名: | Klenow片段（3′→5′exo-），5U/uL | ||
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| 储存条件: | 低温运输，-20℃保存，有效期一年。 | ||
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| 储存条件: | 低温运输，-20℃保存，有效期一年。 |
Klenow片段（3′→5′exo-），5U/uL
英文名称：Klenow Fragment（Klenow DNA Polymerase）
运输：低温
保存：负31度
有效期：1年
货期：1-3天
其他：
产品介绍：
用于探针标记和末端补齐
产品及特点
Klenow 片段是大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物。它保留了 DNA 聚合酶活性，具有 3’→ 5’外切酶活性，但不具有 5´→3´ 外切核酸酶活性。可 以在 DNA 模板和引物存在的条件下，选择性地催化底物 dNTP 沿 5’→ 3’方向 合成与模板互补的 DNA。本产品是重组表达得到，它具体有下列用途：
1. 双链 DNA5’突出末端的平滑化。
2. 用随机引物制备探针。
3. 随机引物标记法。
4. 寡核苷酸定向诱变（Oligonucleotide directed mutagenesis）中双链 DNA 的合成。 5. 双脱氧法 DNA 序列测定（Sanger 法）。
运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 模板 DNA；引物
使用方法 使用举例：随机引物的同位素标记反应
1. 在微量离心管中配制下列反应液
2. 95℃保温 3 分钟。然后冰中急冷 5 分钟。
3. 加入 2.5 μl 10×Klenow Fragment Buffer。
4. 加入 2.5 μl dNTP (0.2 mM dATP,dGTP,dTTP)。
5. 加入 5 μl 111 TBq/mmol [α32P].dCTP3000 Ci/mmol)(1.85 MBq, 50μCi)
6. 加入 1 μl 本产品，反应液共 25 μl。
7. 37℃反应 3 小时。
65℃加热 5 分钟。反应液可直接作为探针使用。如有必要，可以通过用
柱式探针纯化试剂盒除去未反应的标记的 dCTP。
