一管式病毒DNA-RNAout

一管式病毒DNA-RNAout

英文名称：One-Tube Viral DNA-RNAOUT 

运输：常温

保存：常温

有效期：1年

货期：1-2天

其他：

产品介绍：

沉淀法一管中提取病毒DNA和RNA

产品及特点 

本产品是基因整合一管式病毒 DNAOUT和一管式病毒 RNAOUT两产品而得，专门用于从血清(血浆)等液体样品中同时提取病毒 DNA (如 HBV DNA)和病毒 RNA (如 HCV RNA 和 HIV RNA)的产品。本产品具有下列特点：

1. 回收率高，可以达到 90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。可以跟 QIAGEN 的同类产品媲美。

2. 灵敏度高，通过 PCR 检测到病毒 DNA 的最终灵敏度可以达到 30 拷贝/mL样品，通过 RT-PCR 检测到病毒 RNA 的最终灵敏度可以达到 50 拷贝/mL样品。

3. 一管式操作，减少了样品污染的可能。

4. 一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。

5. 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。

6. 处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理 1.5 mL 液体病毒样品。

7. 与 PCR、荧光 PCR、RT-PCR、荧光 RT-PCR 等

运输及保存 常温运输和保存，但一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A 长期保存（一月以上）最

好放 4℃，有效期一年。溶液 B 和溶液 C 具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

自备试剂 无

使用方法

1. 将 0.1-0.2 mL 液体样品转移到 1.5 mL 旋盖离心管中。如果需要富集样品中的病毒，可以先将 1.5 mL 液体样品转移到 1.5 mL 旋盖离心管中,然后 4℃24,000 g 离心 60 分钟，移弃 1.3 mL 上清液后继续操作下一步的操作。

2. 加入 0.6 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A，盖上盖子后振荡 3-5 秒. 注意: 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A 用前需 37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。

3. 室温静置 10 分钟。

4. 加入 0.6 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 B，盖上盖子后振荡 3-5 秒。

5. 15,000 g 室温离心 15 分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。

6. 小心移弃上清。注意不要触及管底的 DNA 和 RNA 沉淀。

7. 加入 1.0 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 C，振荡数秒后 15,000 g 室温离心 5 分钟。注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。

8. 移弃上清，注意不要触及管底的 DNA 和 RNA 沉淀。

9. 短暂离心数秒, 注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。

10. 小心移弃残留上清（残留的一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 C 会影响后续反应）。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀。

11. 加入 100-200 μl 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有 DNA 和 RNA，必须取混合液使用（哪怕很浑浊）。

12. 直接取适量样品用于 PCR 或 RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

使用效果

DNA 病毒图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取 0.2 mL HBV 阳性血浆(含 1000

拷贝/mL HBV)，DNA 溶于 200 ul 溶液 D 中，取 5 ul 进行荧光 PCR(使用

MJ Research 的 CHROMO4 荧光 PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表

示市场上某同类产品。

RNA 病毒 

图注：用本产品和市场上进口 Q 公司同类产品分别提取 0.2 mL 培养的 B 型流感病毒上清液(含 1000 拷贝/mL 病毒)，RNA 溶于 200 uL 溶液 D 中，取10 uL 进行荧光 PCR(50 uL 体系，使用 MJ Research 的 CHROMO4 荧光PCR 仪)。红线表示本产品，蓝线表示进口的 Q 公司同类产品。