血液DNAout

血液DNAout

英文名称：Blood DNAOUT

运输：常温

保存：常温

有效期：1年

货期：1-2天

其他：

产品介绍：

产品及特点

本产品是基于经典离心法的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组 DNA 的试剂。具有下列特点：

1. DNA 纯净，OD260/OD280 在 1.8-2.0 之间，可直接用于 PCR、酶切、杂交等实验。DNA 产量一般在 30-50 ug/mL 全血。

2. 操作简单，整个过程约 15 分钟，室温操作，适合大规模样品处理。

3. 一次的血液处理量最多可达 5 mL，不需要柱子，不会发生其他同类产品经常发生的堵塞现象。

4. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格只有其一半左右。

5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

运输及保存 运输及保存，有效期一年。 自备试剂 氯仿、异丙醇、75%乙醇。

使用方法 

1. 在装有抗凝血液的离心管中，按 1：1 的比例加入红细胞裂解液 A 型并轻柔颠倒混匀。

2. 5000-10000 g 室温离心 2 分钟，小心吸弃弃上清。

3. 将沉淀重悬于 1/2 体积（按最初血液的体积计算）的红细胞裂解液 A 型中，轻柔吹打混匀后 5000-10000 g 室温离心 2 分钟。

4. 小心弃去上清，沉淀即为去除了红细胞和白细胞胞浆的白细胞细胞核。

5. 在白细胞细胞核中加入 0.6 mL 溶液 A（溶液 A 用前需要充分摇匀），用移液枪轻柔吹打混匀（剧烈吹打会打断 DNA）。

6. 68℃水浴 10 分钟（此步可省略，但产量略有降低）。

7. 加入 0.2 mL 氯仿和 0.3 mL 溶液 B，立即小心颠倒混匀。

8. 室温 13000-15000 g 离心 3 分钟，小心将上清（约 0.7 mL）转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中。

9. 加入等体积异丙醇（自备），轻柔颠倒混匀 5-8 次，此时一般会出现絮状 DNA 沉淀。DNA 可以用下列方法之一回收。

10. 方法一：可以用枪头将絮状 DNA 挑出，放在 1 mL 75%乙醇中几十秒使其中的盐离子进入乙醇中，然后再挑出 DNA，在空气中放半分钟使乙醇挥发，再转移到 0.1-0.3 mL 自备的 TE 缓冲液中溶解过夜（大分子的DNA 需要长时间才能彻底溶解）。

11. 方法二：室温 13000-15000 g 离心 1 分钟，去尽上清。在 DNA 沉淀中加入 75%乙醇，震荡后室温 13000-15000 g 离心 1 分钟，去尽上清（含盐离子）。重复 75%乙醇洗涤一次。短暂离心，去尽残留 75%乙醇（此步十分重要，不要省略，否则乙醇会影响 DNA 的溶解和后续的使用），最后在 DNA 沉淀中加入 0.1-0.3 mL 自备的 TE 缓冲液过夜溶解DNA 待用。